PCR儀的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。維護(hù):
1.清洗樣品池:先打開(kāi)蓋子,用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,再清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,再借助棉簽吸干剩余液體;打開(kāi)PCR儀,設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運(yùn)行,讓殘余液體揮發(fā),一般5-10min即可。
2.清洗熱蓋:對(duì)于熒光定量PCR儀,當(dāng)熒光污染出現(xiàn)且污染不是來(lái)自樣品池時(shí),或當(dāng)有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時(shí),需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無(wú)污物阻擋光路。
3.清洗儀器外表面:可除去灰塵和油脂,但達(dá)不到消毒效果,建議選擇沒(méi)有腐蝕性的清洗劑對(duì)儀器外表面進(jìn)行清洗。
4.更換保險(xiǎn)絲:先將PCR儀關(guān)機(jī)并拔去插頭,打開(kāi)電源插口旁邊的保險(xiǎn)盒,換上備用的保險(xiǎn)絲,觀察是否恢復(fù)正常。
5、PCR反應(yīng)過(guò)程的關(guān)鍵是升、降溫過(guò)程的時(shí)間控制,要求越短越好,當(dāng)PCR儀的降溫過(guò)程超過(guò)60s,就應(yīng)該檢查儀器的制冷系統(tǒng)——風(fēng)冷制冷的PCR儀要清理反應(yīng)底座的灰塵,其他制冷系統(tǒng)應(yīng)檢查相關(guān)的制冷部件。